FectOPTIMUM
产品信息：
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产品编号 |
规格 |
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FectOPTIMUM 100 |
100 μl |
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FectOPTIMUM 200 |
200 μl |
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FectOPTIMUM 1500 |
1500 μl |
实验材料：
实验材料：
•本产品，包含FectOPTIMUM和FectOPTIMUM Buffer两种试剂
•高纯度的核酸储液（0.5～5 ug/uL）
•Opti-MEM 减血清培养基
质量控制：
•4 ℃保存条件下有效期一年
•本产品经严格的质量检验证明，无生物污染
储存及运输：
产品4 ℃密封保存；冰袋（wet ice）运输。
注意事项：
•常温下制备核酸-FectOPTIMUM复合物，使用灭酶灭菌管，孵育时间20～30 min。
•本产品应该在4℃密闭保存，避免反复冻融。
•体外转染时，初次使用应该优化核酸浓度与FectOPTIMUM的比例以得到最高的转染效率。
测试使用推荐的两种产品用量。
•体外转染时，请使用适当保存和经常传代的健康细胞，并确保培养基无细菌、真菌或支原体
污染。如细胞是近期复苏的液氮冻存细胞，请在转染前至少传代两次。
•体内转染时，可通过改变mRNA的用量和浓度以及FectOPTIMUM用量对体内转染进行优化。
体外多细胞系转染siRNA的沉默效果示例：
FectOPTIMUM递送siRNA至多种难转染细胞系实现高效的靶基因沉默效果
图1. FectOPTIMUM和Lipofectamine 2000TM在多种细胞系中递送siRNA的基因沉默效果。 FectOPTIMUM和 Lipofectamine 2000TM递送siRNA 48 h后检测靶基因CCNB 1 mRNA(A549、Hela、MCF-7)和PTEN mRNA(4T1)相对持家基因GAPDH mRNA的表达水平（24孔板，每孔转染0.5 μg siRNA ）。
体内转染siRNA的基因沉默效果示例：
FectOPTIMUM能够实现递送siRNA在小鼠体内针对肺部组织的高效靶向递送和沉默效果
图2. FectOPTIMUM体内递送siRNA基因沉默效果。 FectOPTIMUM与siPTEN的组装复合物通过尾静脉注射入C57BL/6小鼠（20 g）体内48 h后分别检测心、脾、肾、肝和肺组织中靶基因PTEN mRNA(4T1)相对持家基因GAPDH mRNA的表达水平。肺部PTEN mRNA的相对表达水平最低，平均为0.214，沉默效果最好。
体外多细胞系转染mRNA的表达效果示例：
FectOPTIMUM递送mRNA至多种难转染细胞系均实现超高的阳性率和高效的mRNA表达
图3. FectOPTIMUM和Lipofectamine 2000TM在多种细胞系中递送mRNA的表达效果。 FectOPTIMUM和 Lipofectamine 2000TM递送GFP mRNA 48 h后通过倒置荧光显微镜观察GFP表达效果（上图，比例尺100 μm），通过流式细胞仪检测表达GFP的细胞的阳性率（下图）（24孔板，每孔转染1 μg mRNA ）。
体内转染mRNA的表达效果示例：
FectOPTIMUM能够实现mRNA在小鼠体内针对肺部组织的高效靶向递送和蛋白表达
图4. FectOPTIMUM体内递送mRNA基因表达效果。FectOPTIMUM 与Firefly Luciferase mRNA的组装复合物通过尾静脉注射入BALB/c-nu无胸腺裸鼠（20 g）体内6 h后，腹腔注射200 μL d-荧光素（ PBS中20 mg/mL）, 15 min后处死小鼠，分离脏器(心、脾、肾、肝、肺)，用IVIS成像系统成像。生物发光主要集中在肺部，肺部ROI值平均在107左右。
